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紫外可见分光光度计的原理

    紫外可见分光光度计的工作原理:基于朗伯-比耳(Lambert-Beer)定律,即物质在一定浓度下的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比。
通常表述为:当一束平行的单色光通过某一均匀的有色溶液时,溶液的吸光度与溶液的浓度和光程的乘积成正比,其数学表达式如下:
A=-lg( It/I0 )= - lgT= =εbC
式中,A 为吸光度;I0为入射的单色光强度;It为透射的单色光强度;T为物质的透射率;ε为摩尔吸光系数(L·mol-1·cm-1);b为被吸收层厚度(cm),即比色皿的光程;C为物质的摩尔浓度(mol·L-1);


紫外可见分光光度计的光谱范围

    常见的紫外-可见分光光度计的波长范围为190-1100 nm。通常所指的可见光谱范围为400-700 nm,是指被人眼能感知到的光谱范围,200-400 nm为紫外光谱范围。一般,在可见区测试的样品必须是有色物质。


紫外可见分光光度计常见应用

    紫外-可见分光光度计广泛应用于制药、医疗卫生、化工、能源、机械、冶金、环保、地质、食品、生物、材料、农业、林业、渔业等行业,在高等教育、计量科学和科研院所中的教学、科研领域,以及生产中的质量控制,原材料和产品检验等各方面发挥着重要作用,是理化实验室常用的分析仪器。

具体应用如下:

1)核酸、蛋白浓度测量以及细菌生长浓度测量。

2)食品、水质、合金等样品中的金属元素(如铁、锰、镉、铜、铝等)及非金属元素(如硅、磷/磷酸盐、硝酸盐、硫酸盐、氟化物等)分析。

3)与其他分析仪器联用,并进行定性分析,如有机化合物的分析、药物分析。常见的 分析手段如:与标准物及标准图谱对照;比较最大吸收波长吸收系数的一致性。


紫外可见分光光度计的维护、保养

    紫外-可见分光光度计属于精密仪器,在运行过程中因工作环境、操作方法等原因,其电子和光学元器件的性能可能会发生改变,进一步影响设备性能,甚至引起设备故障或事故。因此,分析工作者必须了解紫外-可见分光光度计的基本原理和操作方法,遇到故障现象时可快速做出判断并及时联系厂家维修,确保设备的正常运行。

仪器的安装应满足下列条件要求:

1)温湿度要求:仪器应安放于干燥的房间,使用温度在5℃~35℃范围内,相对湿度≤85%。

2)电源要求:额定电压为220V ± 22V AC (或110V±11V AC),频率为50Hz (或60Hz),应有良好的接地。建议使用1000W以上的电子交流稳压器或交流稳压器,以加强仪器的抗干扰性能。

3)其它工作条件:应避开有强烈振动和持续振动的场所;避免放在有阳光直接照射和有较大气流扰动、以及有腐蚀性气体和灰尘多的场所;应远离发出磁场、电场和高频电磁波的电气装置;应放置于可承重的稳定水平台面,建议仪器背部距墙壁至少 15cm 以上,以保持有效的通风散热。


紫外可见分光光度计操作的简要操作步骤

1)开机、自检

2)功能选择

3)波长设定

4)调0A或100%T

5)测量


紫外可见分光光度计的使用方法

1)溶液装入比色皿约2/3高度处为宜;尽量避免气泡的产生;若溶液残留在比色皿外壁,应及时擦拭干净(先用滤纸吸干,然后用擦镜纸轻拭光面);对于易挥发的样品,建议使用比色皿盖;尽量避免沾污样品架,否则应及时擦去样品架上残留液体。

2)比色皿使用完毕应及时清洗,并用适当的方法清洗,若清洗不当或没有清洗干净,也会影响测量结果的准确度和稳定性。

3)测试过程中,若某一光源不用,可选择将其关闭,以延长灯的使用寿命;仪器不用时,请及时关机、并拔掉电源插头,以防止雷雨天气可能造成的损坏。

4)请勿擅自拆卸仪器外壳和内部零部件,尤其是光路结构部分,切勿随意松动其紧固螺钉和螺母;请勿随意触碰各光学表面(包括光源),以免影响仪器的正常工作、甚至造成人为损坏。

5)保持仪器表面和工作环境的清洁;杜绝使用汽油、乙醚等有机溶液擦拭仪器外壳;仪器不用时可用防尘罩进行防护。

6)仪器应避免长期不用,建议定期开机确保其能正常运转;温、湿度较高的地区应特别注意防潮。